一种利用

一种利用
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co-γ
射线辐照提高甜菜夜蛾产卵量的方法
技术领域
1.本发明属于农林业生物技术领域，涉及一种利用γ射线提高甜菜夜蛾产卵量的方法，具体是一种利用
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co-γ射线辐照甜菜夜蛾雄蛹，用以促进其羽化后提高雌成虫产卵量的方法。


背景技术：

2.甜菜夜蛾spodoptera exigua h
ü
bner，又称青布袋虫、玉米叶夜蛾，属鳞翅目，夜蛾科，杂夜蛾亚科，灰夜蛾属，也是一种重要的农业害虫，可为害甘蓝、花椰菜、白菜、萝卜、莴苣、大葱、番茄、青椒等170多种蔬菜和作物。同时，甜菜夜蛾也作为昆虫核多角体病毒生产材料，或作为饲养天敌的寄主昆虫，因此，在室内条件下常年提供大量发育一致、生理划一的虫源是一个十分重要的内容。
3.目前，在甜菜夜蛾的室内繁育技术的研究方面，国内外报道较多，总体上是按不同谷物饲料配方配置人工饲料，按照夜蛾科昆虫的饲养方法，但现有的繁育技术研究多数都是在饲养装置、饲料等方面着手，能提高成虫的存活率。经检索，未见有关提高甜菜夜蛾雌成虫产卵量，尤其是利用
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co-γ射线辐照提高甜菜夜蛾雌成虫产卵量的相关报道。


技术实现要素：

4.本发明的目的是提供一种利用
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co-γ射线辐照提高甜菜夜蛾产卵量的方法，以定期化蛹的甜菜夜蛾蛹作为材料，经一致性有效积温培养后再对雄蛹实施
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co源精准辐照剂量，然后将羽化的雌雄成虫配对饲养，能够在确保甜菜夜蛾蛹羽化率、成虫寿命的前提下，较大程度地提升甜菜夜蛾的产卵量，提升试虫生产量。其操作流程简单，安全可靠，为方便快捷地利用甜菜夜蛾生产生物防治剂核多角体病毒，以及利用该虫作为寄主扩繁天敌寄生蜂，提供了大量的生产虫源。
5.为了实现上述目的，本发明的技术方案为：
6.一种利用
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co-γ射线辐照提高甜菜夜蛾产卵量的方法，包括以下步骤：
7.步骤s1：固定有效积温培养处理
8.步骤s11：从野外采集的种群或室内人工饲养的种群中，收集12h内蛹龄的甜菜夜蛾蛹，放置于牛皮纸袋中，并密封袋口；
9.步骤s12：将牛皮纸袋置于26～28℃恒定温度和光照8～12h的培养箱中，培养5～6天，即蛹的有效积温达48.5～70.2日
·
度(5日
×
(26度-16.3度)～6日
×
(28度-16.3度))，待接收辐照；
10.步骤s2：辐照处理
11.步骤s21：选取经过有效积温处理的甜菜夜蛾雄蛹，置于牛皮纸袋中，用
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co源进行辐照，辐照剂量为50gy；
12.步骤s22：辐照
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co源的强度要求：co源保存于深度为水下6～10m，辐照剂量率为0.5～4gy/min；
13.步骤s3：蛹培养以及成虫饲养
14.步骤s31：将辐照后的甜菜夜蛾雄蛹，与经过有效积温处理但未辐照处理的甜菜夜蛾雌蛹，按雌雄比为1：1的比例混合，再置于牛皮纸袋中，置于26～28℃恒定温度和光照8～12h的培养箱中进行培养；
15.步骤s32：待蛹羽化成虫后，将成虫移到尼龙网的成虫饲养笼中，笼中悬挂产卵承载介质，用于引诱成虫产卵，并补充蜜糖水作为成虫的补充营养；
16.步骤s33：每天清晨更替产卵承载介质，用水对卵块冲洗，置于室温下，待卵孵化幼虫后，在室内使用植物寄主叶片或人工饲料继代饲养。
17.进一步地，所述步骤s12、步骤s31中，所述培养箱是具有温、湿度和光照控制的人工气候箱或植物动物培养箱。
18.进一步地，所述步骤s12中，所述培养箱设置26～28℃恒定温度，是指在26至28℃之间设定某一恒定温度；所述培养箱设置光照8～12h时间，是指在一天(24h)内设定光照时间在8至12h之间。
19.进一步地，所述步骤s21中，所述辐照过程中配有剂量计，以保证精度。所述剂量计为配有30～40根误差为
±
0.1gy的剂量计。
20.进一步地，所述产卵承载介质是牛皮纸或硫酸纸。
21.进一步地，所述步骤s32中，所述蜜糖水的浓度为10～20％。
22.进一步地，所述步骤s32中，所述成虫饲养笼中，成虫密度体积为15～30cm3/头。
23.进一步地，所述步骤s33中，所述水是生理盐水或纯净水。优选地，所述生理盐水是浓度为0.9％的氯化钠溶液。
24.与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
25.1、本发明通过控制温度和光照方法，选育出大量发育一致的甜菜夜蛾5-6日龄的蛹作为辐照对象，能够在确保甜菜夜蛾蛹羽化率、成虫寿命的前提下，较大程度上促进甜菜夜蛾的产卵量，提升试虫产量。其操作流程简单，安全可靠，为方便快捷地利用甜菜夜蛾生产生物防治剂核多角体病毒，以及利用该虫作为寄主扩繁天敌寄生蜂，提供了大量的生产虫源。
26.2、以蛹作为相对固定不活动处理虫态，能够确保在处理期间辐照γ射线对每个试虫平均辐照穿透效果，刺激昆虫机体的生长响应，且前期试虫处理简单，受制因素小，有利于操作标准化。
27.3、利用
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co作为昆虫处理辐照源进行低剂量辐照，能促进甜菜夜蛾生长，提高产卵量，达到促进甜菜夜蛾增量增产的目的，有利于工厂化试虫生产与实施。
具体实施方式
28.下面结合实施例，对本发明的具体实施方式作进一步详细描述。以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到，其中以分析纯试剂作为优选试剂。
29.实施例一
30.1、恒温处理甜菜夜蛾蛹使其发育有效积温一致
31.从室内种群中挑选12h内化蛹的甜菜夜蛾蛹，鉴别雌、雄后按雌雄比例为1:1选取甜菜夜蛾雌雄蛹80头(雌雄各40头)，放置于牛皮纸袋中，并密封袋口。置于27℃恒定常温和光照10h的人工气候箱中，培养5天后取出，待进行辐照。
32.2、
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co源辐照处理甜菜夜蛾蛹
33.将经过恒温处理的5日龄甜菜夜蛾雄蛹装入牛皮纸袋，送至海南省海口市中核海原辐照厂进行辐照处理，利用水下8m深的co源拉出后辐照，辐照剂量为50gy，剂量率设置为3gy/min，并配有30～40根误差为
±
0.1gy的剂量计以保证精度。
34.3、辐照后的蛹、成虫处理和继代饲养及其生物学观察
35.将受辐照处理的甜菜夜蛾雄蛹带回实验室后，选取经过恒温处理但未辐照处理的甜菜夜蛾雌蛹，按雌雄比为1：1的比例混合，放入至人工气候箱中培养至羽化，记录羽化情况。配对雌雄成虫各10头投入至30
×
30
×
30cm养虫笼中，投入含15％蜜糖水的棉花球为补充营养，每天分别记录雌雄虫存活寿命。2天后，在笼子顶中央悬挂一张约15
×
15cm牛皮纸作为甜菜夜蛾产卵承载介质，用于诱集产卵。每天清晨更替一次牛皮纸，检查并沿卵块外边缘1cm处剪下含卵块的纸片，用含生理盐水的注射器冲洗卵块，去除可能病原物，晾干后待保存，待孵化幼虫后，记录产卵情况、卵孵化情况。本处理重复3次。
36.实施例二
37.1、恒温处理甜菜夜蛾蛹使其发育有效积温一致
38.从室内种群中挑选12h内化蛹的甜菜夜蛾蛹，鉴别雌、雄后按雌雄比例为1:1选取甜菜夜蛾雌雄蛹80头(雌雄各40头)，放置于牛皮纸袋中，并密封袋口。置于28℃恒定常温和光照8h的人工气候箱中，培养6天后取出，待进行辐照。
39.2、
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co源辐照处理甜菜夜蛾蛹
40.将经过恒温处理的6日龄甜菜夜蛾雄蛹装入牛皮纸袋，送至海南省海口市中核海原辐照厂进行辐照处理，利用水下6.5m深的co源拉出后辐照，辐照剂量为50gy，剂量率设置为2gy/min，并配有30～40根误差为
±
0.1gy的剂量计以保证精度。
41.3、辐照后的蛹、成虫处理和继代饲养及其生物学观察
42.将受辐照处理的甜菜夜蛾雄蛹带回实验室后，选取经过恒温处理但未辐照处理的甜菜夜蛾雌蛹，按雌雄比为1：1的比例混合，放入至人工气候箱中培养至羽化，记录羽化情况。配对雌雄成虫各10头投入至30
×
30
×
30cm养虫笼中，投入含10％蜜糖水的棉花球为补充营养，每天分别记录雌雄虫存活寿命。2天后，在笼子顶中央悬挂一张约15
×
15cm硫酸纸作为甜菜夜蛾产卵承载介质，用于诱集产卵。每天清晨更替一次硫酸纸，检查并沿卵块外边缘1cm处剪下含卵块的纸片，用含生理盐水的注射器冲洗卵块，去除可能病原物，晾干后待保存，待孵化幼虫后，记录产卵情况、卵孵化情况。本处理重复3次。
43.实施例三
44.1、恒温处理甜菜夜蛾蛹使其发育有效积温一致
45.从室内种群中挑选12h内化蛹的甜菜夜蛾蛹，鉴别雌、雄后按雌雄比例为1:1选取甜菜夜蛾雌雄蛹80头(雌雄各40头)，放置于牛皮纸袋中，并密封袋口。置于26℃恒定常温和光照12h的人工气候箱中，培养6天后取出，待进行辐照。
46.2、
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co源辐照处理甜菜夜蛾蛹
47.将经过恒温处理的6日龄甜菜夜蛾雄蛹装入牛皮纸袋，送至海南省海口市中核海
原辐照厂进行辐照处理，利用水下9m深的co源拉出后辐照，辐照剂量为50gy，剂量率设置为1.5gy/min，并配有30～40根误差为
±
0.1gy的剂量计以保证精度。
48.3、辐照后的蛹、成虫处理和继代饲养及其生物学观察
49.将受辐照处理的甜菜夜蛾雄蛹带回实验室后，选取经过恒温处理但未辐照处理的甜菜夜蛾雌蛹，按雌雄比为1：1的比例混合，放入至人工气候箱中培养至羽化，记录羽化情况。配对雌雄成虫各10头投入至30
×
30
×
30cm养虫笼中，投入含20％蜜糖水的棉花球为补充营养，每天分别记录雌雄虫存活寿命。2天后，在笼子顶中央悬挂一张约15
×
15cm牛皮纸作为甜菜夜蛾产卵承载介质，用于诱集产卵。每天清晨更替一次牛皮纸，检查并沿卵块外边缘1cm处剪下含卵块的纸片，用含生理盐水的注射器冲洗卵块，去除可能病原物，晾干后待保存，待孵化幼虫后，记录产卵情况、卵孵化情况。本处理重复3次。
50.对比试验：
51.过程同实施例一，调整甜菜夜蛾蛹的辐照剂量。分别设置对照一：10gy辐照雄蛹+10gy辐照雌蛹；对照二：100gy辐照雄蛹+未辐照雌蛹；对照三：300gy辐照雄蛹+未辐照雌蛹；对照四：未辐照雄蛹+未辐照雌蛹。分别记录羽化、成虫存活寿命、产卵量和孵化情况。
52.蛹羽化率＝(羽化的蛹数/总蛹数)
×
100％
53.卵孵化率＝(孵化幼虫数/观察卵粒数)
×
100％
54.单雌产卵量＝总产卵量/产卵的雌虫数
55.根据记录的数据，计算羽化率、成虫寿命、单雌产卵量和孵化率，结果见表1、表2、表3。
56.表1不同剂量辐照后甜菜夜蛾蛹的羽化情况
57.项目辐照剂量甜菜夜蛾雌虫甜菜夜蛾雄虫实施例一50gy90.0％
±
5.8％a100.0％a实施例二50gy87.2％
±
6.2％a100.0％a实施例三50gy88.6％
±
3.9％a100.0％a对照一10gy81.7％
±
4.4％a100.0％a对照二100gy89.0％
±
1.2％a100.0％a对照三300gy85.7％
±
3.1％a90.0％
±
5.8％a对照四0gy86.7％
±
3.3％a100.0％a
58.从表1中可以看出：使用50gy剂量
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co源辐照处理甜菜夜蛾雄蛹，其羽化率为100％，与其它剂量对照组(10gy、100gy、300gy、0gy)在90％至100％之间的羽化率相比，无显著差异。采用10gy辐照的甜菜夜蛾雌蛹(对照一)，其羽化率81.7％，略低于实施例(未辐照)以及其它对照组(未辐照)羽化率。表明了10gy辐照甜菜夜蛾雌蛹对其羽化率产生了一定影响。
59.表2不同剂量辐照甜菜夜蛾的成虫寿命(天)
60.项目辐照剂量甜菜夜蛾雌虫甜菜夜蛾雄虫实施例一50gy11.0
±
1.7a12.3
±
0.3a实施例二50gy11.7
±
3.4a11.8
±
1.5a实施例三50gy10.2
±
0.6a12.0
±
0.8a对照一10gy8.5
±
2.0a9.5
±
1.3ab
对照二100gy10.4
±
1.0a9.5
±
1.7ab对照三300gy10.0
±
1.0a10.0
±
0.5ab对照四0gy10.0
±
0.7a6.5
±
0.3b
61.从表2中可以看出：不同剂量辐照甜菜夜蛾雄蛹，雄成虫寿命存在较大变化，其中采用50gy辐照甜菜夜蛾雄蛹，其中雄成虫的寿命最高，为12.3天，显著高于对照四(未辐照)雄成虫寿命(6.5天)。采用10gy辐照的甜菜夜蛾雌蛹(对照一)，其寿命为8.5天，低于实施例(未辐照)以及其它对照组(未辐照)的雌成虫寿命。表明本发明可有效地提高甜菜夜蛾的雄成虫寿命，但辐照甜菜夜蛾雌蛹，对其雌成虫寿命产生了一定影响。
62.表3不同剂量辐照甜菜夜蛾的产卵量与孵化率情况
[0063][0064]
从表3中可以看出：使用50gy辐照甜菜夜蛾的雄蛹，甜菜夜蛾单雌产卵量和卵孵化率显著提高，分别为893.5粒和90.86％％，高于对照四(未辐照)单雌产卵量和卵孵化率，也显著高于其它剂量辐照处理。表明本发明采用50gy辐照甜菜夜蛾雄蛹可有效地提高甜菜夜蛾的单雌产卵量和卵孵化率，在人工饲养扩繁甜菜夜蛾中获得有益种群繁殖的效果。
[0065]
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明技术原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

技术特征：
1.一种利用
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co-γ射线辐照提高甜菜夜蛾产卵量的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤s1：固定有效积温培养处理步骤s11：从野外采集的种群或室内人工饲养的种群中，收集12h内蛹龄的甜菜夜蛾蛹，放置于牛皮纸袋中，并密封袋口；步骤s12：将牛皮纸袋置于26～28℃恒定温度和光照8～12h的培养箱中，培养5～6天，即蛹的有效积温达48.5～70.2日
·
度，待接收辐照；步骤s2：辐照处理步骤s21：选取经过有效积温处理的甜菜夜蛾雄蛹，置于牛皮纸袋中，用
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co源进行辐照，辐照剂量为50gy；步骤s22：辐照
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co源的强度要求：co源保存于深度为水下6～10m，辐照剂量率为0.5～4gy/min；步骤s3：蛹培养以及成虫饲养步骤s31：将辐照后的甜菜夜蛾雄蛹，与经过有效积温处理但未辐照处理的甜菜夜蛾雌蛹，按雌雄比为1：1的比例混合，再置于牛皮纸袋中，置于26～28℃恒定温度和光照8～12h的培养箱中进行培养；步骤s32：待蛹羽化成虫后，将成虫移到尼龙网的成虫饲养笼中，笼中悬挂产卵承载介质，并补充蜜糖水作为成虫的补充营养；步骤s33：每天清晨更替产卵承载介质，用水对卵块冲洗，置于室温下，待卵孵化幼虫后，在室内使用植物寄主叶片或人工饲料继代饲养。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤s12、步骤s31中，所述培养箱是具有温、湿度和光照控制的人工气候箱或植物动物培养箱。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤s12中，所述培养箱设置26～28℃恒定温度，是指在26至28℃之间设定某一恒定温度；所述培养箱设置光照8～12h时间，是指在一天内设定光照时间在8至12h之间。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤s21中，所述辐照过程中配有剂量计。5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：所述剂量计为配有30～40根误差为
±
0.1gy的剂量计。6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤s32中，所述产卵承载介质是牛皮纸或硫酸纸。7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤s32中，所述蜜糖水的浓度为10～20％。8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤s32中，所述成虫饲养笼中，成虫密度体积为15～30cm3/头。9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤s33中，所述水是生理盐水或纯净水。10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于：所述生理盐水是浓度为0.9％的氯化钠溶液。

技术总结
本发明属于农林业生物技术领域，涉及一种利用


技术研发人员：金涛 郝铮 林玉英 温海波 钟浩 龚治
受保护的技术使用者：中国热带农业科学院环境与植物保护研究所
技术研发日：2023.06.12
技术公布日：2023/8/9